Stap 8: Atomic Force microscopie
Nadat wij hadden geverifiërd dat het bestaan van de nanostructuren via Elektroforese van het gel, waren we erg blij dat ons proces werkte, maar wij onze resultaten wilden . En dus gebruikten we een atomaire kracht Microscoop.
Atomic force microscopie (AFM) of scannen-force microscopie (SFM) is een zeer hoge resolutie scanning probe microscopie (SPM), met aantoonbare resolutie over de volgorde van breuken van een nanometer, meer dan 1000 keer beter dan de optische diffractie-limiet.
Voorbereiding van de ondergrond
We moesten eerst de dia voorbereiden door de AFM die is gemaakt van gladde, gepolijste mica. Ten eerste met het magische gereedschap, plakband, we het oppervlak van de mica gereinigd door steken de lijm aan de oppervlakte van mica en het snel rippen uit. Het oppervlak zichtbaar was meer glanzend na verschillende verbrijzelen processen. Op het oppervlak we toegevoegd 20 uL van oplossingen die bestaan uit 2 uL van de verzamelde DNA-origami en de 18 uL van de buffer.
Met behulp van de Atomic Force Microscope
Zodra het substraat was geladen op de AFM, gekalibreerd we het systeem. De AFM werd gebruikt in te tikken modus onder vloeistoffase. We gebruikten een groot raam van ~ 6 um om een groot gezichtsveld van de nanostructuren. Veel heel veel 'As' werd meer en meer zichtbaar als we de machine gericht. Zodra we een greep op het systeem had, doken we dieper op de details op te lossen van resolutiebeelden met een hogere van enkele nanostructuren.
Beeldverwerking
De atomaire kracht beelden werden gered door de software als gegevensbestanden Nanoscope AFM. Als het gebeurt, is er een open source programma Gwyddion die kunnen laden en verwerken deze gegevensbestanden. Eenmaal in Gwyddion konden we de beelden als png (of een andere afbeelding)-bestanden exporteren, evenals het meten van de functies op de oppervlakte, enz.
Alternatief voor de aanschaf van een AFM
Atomaire kracht microscopen zijn duur te kopen en te onderhouden, maar er zijn verschillende opties die mogelijke alternatieven zijn: een is om contact met een contractservice laboratorium staat te doen van de AFM, bijvoorbeeld via het portaal Assay Depot . Ook kon je een plaatselijke universiteit met AFM apparatuur die bereid zijn zou te helpen. Als er genoeg belangstelling, misschien overtuigen van uw lokale bio hacker ruimte te verwerven een wel aanspreekbaar. En tenslotte, is er ook een instructable moet maken; Hoewel het niet lijkt te onttrekken modus of vloeibare fase moest afbeelding DNA origami structuren ondersteunen, kon u proberen deze functies toe te voegen!
