Stap 3: Het toevoegen van een antibioticum
We voegen antibioticum om ervoor te zorgen dat alleen onze bacteriën met onze gen van belang (Indiase) aanwezig in de cultuur zijn. Dit wordt gedaan met behulp van een antibioticum dat onze bacteriën resistent tegen is, omdat we een beschermende gen dat is vlak naast onze Indiase overheid. Daarom voegen we enkele van onze antibioticum, kanamycine, aan een hoeveelheid van 50 mL. De stappen hieronder zijn uiteengezet, en het is belangrijk om te blijven in de omgeving van de vlam te handhaven van een steriele omgeving. De vlam creëert een opwaartse luchtstroom en een verwarmde omgeving om te voorkomen dat bacteriën in uitstappen van de pond-Bouillon. Het gebruik van de video voor referentie over de voltooiing van de volgende stappen uit:
- licht van de Bunsenbrander in een open ruimte op uw bank lab
- vooraf draai de dop op de conische tube van 50 mL
- Verwijder de dop van de LB 500 mL fles; niet zet het op de Bank lab en houden het gezicht naar beneden
- 'vlam' de lip licht door het te zetten in de buurt van de vlam
- plaats de fles naar beneden in de buurt van de vlam terwijl nog het houden van het GLB
- gecombineerd uit bouillon met behulp van een Pipet steun
- Vervang de dop op de fles LB
- de conische buis halen en schroef los en verwijder de dop met de ene hand (de Pipetteer steun moet in de andere hand)
- licht vlam deze lip (voorzichtig niet te krijgen verbrand of iets te smelten)
- in de bouillon toevoegen en vervangen van het GLB op de buis
- Herhaal zo vaak als nodig is om toe te voegen van 50 mL, ervoor zorgend om het verblijf in de buurt van de vlam
- Voeg nu 5 microliters van kanamycine (mijn kanamycine is 50 mg/ml te beginnen dus dat bedrag die u toevoegt afhankelijk van uw beginconcentratie veranderen kan) aan het monster LB op een soortgelijke manier als wanneer aliquoting de Bouillon (u hoeft niet naar de kanamycine, hoewel vlam)
- GLB en mix of vortex de oplossing
